Opis metode predimplantacijske genetske dijagnoze (PGD): značajke i posljedice

Genetska metoda predimplantacijeDijagnoza se koristi za procjenu zdravstvenog statusa embrija dobivenog in vitro oplodnjom prije nego se ugradi u šupljinu maternice. Metoda omogućuje ne samo odabir zdravog budućeg djeteta, već i povećanje izgleda trudnoće. Tehnika je naširoko koristi u svim svjetskim klinikama uključenim u in vitro oplodnju.

Opći koncepti

Genetska dijagnoza prije implantacijeomogućuje vam da provedete sveobuhvatan pregled i isključite prisutnost kromosomskih abnormalnosti općenito ili bilo koje odreĎeno odstupanje. Nedavno je, paralelno s ranijim defektima, provedeno screening gena koji mogu izazvati pojavu tumora u odrasloj dobi (jajnici, crijeva, grudi).

U slučaju prijevoza genomskih bolesti sNa majčinoj strani, prije oplodnje uzima se biopsija nekoliko polarnih jajašaca. Opisane metode su alternativa ranoj prenatalnoj dijagnozi koja vam omogućuje da upozorite na pobačaj ako fetus odjednom ima genetske abnormalnosti.

Genetska dijagnoza prije implantacijeomogućuje određivanje spola budućeg djeteta već u procesu probira. Koristi se za sprečavanje razvoja anomalija vezanih uz seks.

Kako su naslijeđene genetske bolesti?

Postoje nasljedne patologije koje su nastale dominantnim, recesivnim i x-vezanim tipom.

Vrsta nasljeđivanja	Značajke	Rizik od bolesnog djeteta
dominantan	Svaki partner ima jedan defektni gen koji je dominantan u svom paru	50% nasljeđuje gen
recesivan	Oba partnera su nositelji istog defektnog gena, ali u isto vrijeme imaju normalni par	50% postane nositelj, 25% dobije bolest
X-vezani	Žene su zaštićene od patologije njihovim skupom kromosoma i isključivo su nositelji. Muškarci karakteriziraju razvoj anomalija	muškarac ima priliku naslijediti gen i bolest - 50% žena da postane nositelj, poput majke - 50%

Tko je prikazan?

Prethodna implantacijska genetska dijagnoza (PGD) provodi se u sljedećim slučajevima:

1. Prisutnost jednog ili oba od nasljednih bolesti ili promjena u kariotipu. Često su partneri sami svjesni svojih problema, rjeđe će saznati u procesu probira.
2. Uobičajeni pobačaj. Problem ovog nije anomalije roditelja (oni svibanj ne biti), ali genetske mutacije fetusa koji uzrokuju pobačaja.
3. Starost osoba koje prolaze kroz IVF program je preko 38 godina.
4. Više od 3 neuspješna pokušaja in vitro oplodnje u povijesti.
5. Muška neplodnost.
6. Uključivanje ICSI (intracitoplazmatska injekcija sperme) u program oplodnje. Proces je ispunjen razvojem genetskih abnormalnosti u zametku.
7. Slučajevi povlačenja u povijest.

PGD ​​značajke

Istraživanje prije implantacijegenetska dijagnoza sugerira da metoda ima pravo postojati, pomaže u dijagnosticiranju i sprečavanju kromosomskih abnormalnosti, međutim, zahtijeva daljnje poboljšanje.

Značajke PGD-a su sljedeće:

• stopa pobačaja kod probira je niža nego bez njega;
• Trenutno nema dokaza da se povećava mogućnost trudnoće;
• postoji mogućnost pogrešnog rezultata: embrij je zdravi, a rezultat pokazuje abnormalnosti, embrij je bolestan, a studija sugerira drugačije (5-10% slučajeva).

Izvođenje prethodne implantacijske genetske dijagnoze (ispitivanje blastomera)

Nakon sporazuma o ekstrakorporalnomgnojidba stručnjaka za plodnost procjenjuje potrebu za PGD bračnim parom. Ako postoje dokazi, partneri mogu pristati ili odbiti postupak. Zatim se potpisuje dokument koji potvrđuje dozvolu za provođenje ankete.

Trećeg dana nakon oplodnje embrijaGenetičar uzima jednu od formiranih blastomernih stanica za analizu. Smatra se da to nema učinka na fetus, budući da su sve stanice međusobno zamjenjive.

Specijalist provodi istraživanje na jednom odprethodno odabrana područja: proučavanje strukture stanice pod posebnim fluorescentnim mikroskopom, proučavanje DNA pomoću metode lančane reakcije polimeraze kako bi se odredila prisutnost mutacije.

Na temelju rezultata embrija koji imaju anomalije,neće se koristiti u procesu implantacije. Odabir zdravih i kvalitetnih. Zatim jedan ili nekoliko njih prenesu u maternicu šupljine majke.

Pojavljuje se biopsija polarnog tijelaispitivanje kromosomskog skupa majke. To se provodi u slučaju da je ženska linija otkrila prisutnost genetski određene patologije. Postupak vam omogućuje da odredite je li jaje koje će se koristiti za oplodnju zdravo, a da ne ometaju njezinu strukturu. Ako se ne identificiraju anomalije, može se koristiti za oplodnju i prenošenje u utornu šupljinu.

Postoje slučajevi kada se probira.polarnih tijela, a zatim blastomera. To vam omogućuje da dobijete pouzdani rezultat. Shemu prema kojoj će se provesti pregled odabire genetičar.

Metode korištene

Numerički i strukturni poremećaji kromosomaodređen metodom fluorescentne hibridizacije. Ova metoda omogućuje određivanje slijeda DNA stanice. Koriste se posebne DNA sonde koje su u svojoj strukturi komplementarne regije za DNA zonu blastomera.

Sonda ima nukleotid i fluorofor.(molekula sposobna za fluorescenciju). Nakon interakcije ciljanog DNA s DNK sondom nastaju osvijetljena područja koja se promatraju pod fluorescentnim mikroskopom.

Također koristite metodu PCR (lančana reakcija polimeraze). Sastoji se od kopiranja dijela DNA pomoću enzima u određenim laboratorijskim uvjetima.

Dijagnoza aneuploidije

Ovo je jedna od metoda pred-implantacijske genetske dijagnoze, omogućujući otkrivanje prisutnosti numeričkih kromosomskih abnormalnosti (kako bi se odredili dodatni ili nedostajući kromosomi).

Genetički materijal sastoji se od 46 kromosoma,pola je dala otac, a druga polovica majke. Ako embrij dobije dodatni kromosom, to se zove trisomija, a gubitak bilo koje - monosomije. Ovi nedostaci mogu imati sljedeće posljedice:

• nedostatak implantacije embrija;
• spontani pobačaj;
• nasljedne patologije (Downov sindrom, Klinefelter, Sheresevski-Turner).

Muška neplodnost i godina bračnog para često su čimbenici u razvoju takvih anomalija.

PGD ​​monogene patologije

Genetska dijagnoza prije implantacijeembriji za utvrđivanje prisutnosti monogenih bolesti provode se u obiteljima u kojima se utvrđuju nasljedne anomalije. Ako par već ima dijete s homogenom bolešću, onda se prilika da se još jedno bolesno dijete povećava nekoliko puta.

Razlog je kršenje slijeda kromosoma na određenom dijelu DNA. Te bolesti uključuju:

• cistična fibroza;
• adrenogenitalni sindrom;
• fenilketonuriju;
• hemofilija;
• anemija srpastih stanica;
• Vernig-Hoffmanov sindrom.

Prednosti i rizici metode

Prethodna implantacijska genetska dijagnoza, čija se procjena smatra dvosmislenom, ima određene prednosti u području prenatalnog pregleda:

• samo visoko kvalitetni i zdravi zametci prenose se u maternicu;
• smanjuje rizik od djeteta s genetskim abnormalnostima;
• dvostruko veći rizik od pobačaja;
• udvostručio rizik od mnoštva;
• Mogućnost implantacije embrija povećava se za 10%;
• 20% povećava vjerojatnost uspješnog rođenja djeteta.

Rizik nehotičnog oštećenja embrija s PGD-om iznosi 1%. Vjerojatnost pogrešnog rezultata je 1:10, osim toga, 3% mogućnosti da će zametak zametka s bilo kojom anomalija biti ocijenjen kao zdrava.

Vjerojatnost da će zdravi embrij odstupiti rezultatima je 1:10. Vjerojatnost 1: 5 da će prijenos zametaka u maternicu biti otkazan zbog anomalija koje se nalaze u svakoj od njih.

kontraindikacije

Genetska dijagnoza prije implantacije (PGD), čije posljedice za embrij nisu točno identificirane, ima niz kontraindikacija na:

• fragmentiranost embrija od više od 30% (stvaranje fragmenata do 25% smatra se normalnim);
• prisutnost višespojnih blastomera u zametku;
• embrij ima manje od 6 blastomera trećeg dana njegova razvoja.

Sigurnost metode

Dijagnostika se izvodi u ranoj fazi stvaranja budućeg organizma, kada su sve njegove polipotize, tj. Zdravi organizmi mogu se formirati iz svake od njih.

Sve faze PGD-a u tijeku ne uzrokuju vrijeme.embrija, fetusa i nerođenog djeteta. Nakon dobivanja uzorka za ispitivanje, priprema se na poseban način. Stanice se stave na stakleni klizač, koji su fiksirani ili u puferskoj otopini.

Troškovi postupka

Genetska dijagnoza prije implantacije,čija cijena varira od 50 do 120 tisuća rubalja, na prvi pogled, čini se da je riječ o skupoj manipulaciji. Međutim, zdravlje i liječenje djeteta s genetski određenim patologijama koštat će mnogo više.

Postupak daje sve prednosti nad ženamakoji su mogli prirodno shvatiti dijete jer takva dijagnostička metoda nije dostupna. Genetska dijagnoza prije implantacije, čija je cijena manja u usporedbi s in vitro oplodnjom, služi samo kao dodatak općem programu, koji omogućuje ne samo da nose i rađaju, već i da podignu zdravo dijete.